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如何选择生化仪的参数设置问题

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如何选择生化仪的参数设置问题

发布日期:2018-09-12 作者: 点击:

培养皿价格


一、生化仪双波长测定中辅助波长的选择:

双波长的应用是为了消除样品中对测定有干扰的物质的影响,而实际应用中选择辅助波长主要用于消除脂血、溶血、黄疸的干扰。脂血样品中的脂质吸收光谱从300~600nm均有吸收,呈逐渐下降的趋势;溶血样品中的血红蛋白在350nm、400nm、540nm、580nm有4个吸收峰;黄疸样品中的胆红素在300~500nm均有吸收,在400~500nm之间有强吸收峰。由于脂血、溶血、黄疸样品在较宽的波长范围内有较强的吸收光谱存在,因而常常同测定波长有重叠,此时测得的吸光度包含待测物质的吸光度和干扰物质的吸光度,选用辅助波长可消除干扰物质的吸光度。在辅助波长选择中,根据测定波长选择辅助波长,要求干扰物质在测定波长同辅助波长有相同的吸光度。例如:钼酸铵法测定无机磷,其测定波长为340nm,对于溶血样品,血红蛋白在340nm有较强吸收,其吸光度同380nm处吸光度相同,选用380nm作辅助波长,用340nm和380nm两波长的吸光度之差测定无机磷,可消除溶血对测定的干扰。


二、生化仪测定时间的选择:

对于终点分析,测定时间的选择应充分考虑到干扰的问题。例如:溴甲酚绿法测定白蛋白选用一点终点分析法,白蛋白同溴甲酚绿反应快,在一分钟内基本上反应完全,随着反应时间的延长,α 球蛋白同溴甲酚绿反应形成干扰,因而溴甲酚绿法测定白蛋白,其测定时间应定于1分钟。对于速率分析法,一般用于酶活力的测定,而酶活力的大小是用反应速度来表示 ,因而要求在零级反应期内测定反应速率,此时的反应速率不受底物浓度的影响,仅同酶活力大小有关。因此,测定时间应选在零级反应期内。对于一种物质的测定,由于选择试剂和分析方法不同,其测定时间也随之变化,因而对于特定的试剂和分析方法,应先做出反应进程曲线,从曲线上选择最佳的测定时间。


三、生化仪样品量和试剂量的选择:

对于不同的全自动生化分析仪,其测定所需的反应液总量不同。而试剂厂商给出了样品量和试剂量的最佳比例,根据比例同时缩小或增加用量,同时满足最小的反应液总量。 

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