细胞传代制作步骤！

皮氏培养皿是由德国细菌学家朱利斯·理查德·佩特里（juliusrichardpetri）倡导使用的。这种玻璃制品可以高温消毒清洗后反复使用。由在德国生物学家罗伯特·科赫手下工作的细菌学家朱利斯·理查德·佩特里（1852－1921）于1887年设计，故又称为“佩特里皿”。作为一个培养皿厂家，今天小编就来和大家聊一聊细胞传代制作步骤吧。

首先是取出预热好的培养用液：取出已经预热好的培养用液，用酒精棉球擦拭好后方能放入超净台内。从培养箱内取出细胞：注意培养瓶取出细胞时要旋紧瓶盖，用酒精棉球擦拭显微镜的台面，再在镜下观察细胞。将培养瓶放入超净工作台后打开瓶口，同时要在酒精灯上烧口消毒。

之后加入消化液：小心吸出旧培养液，用PBS清洗（冲洗），加入适量消化液（胰蛋白酶液），注意消化液的量以盖住细胞较好，消化温度是37℃。显微镜下观察细胞：倒置显微镜下观察消化细胞，若胞质回缩，细胞之间不再连接成片，表明此时细胞消化适度。 弃去胰蛋白酶液，加入新鲜的培养液终止反应。小心吹打成细胞悬液。将细胞悬液吸入10 ml离心管中。平衡后将离心管放入离心机中，以1000 rpm/min离心5 min。 弃去上清液，加入适当体积的培养液，用滴管轻轻吹打细胞制成细胞悬液。将细胞悬液吸出分装至2-3个培养瓶中，加入适量培养基旋紧瓶盖。

再然后，显微镜下观察细胞：倒置显微镜下观察细胞量，必要时计数。注意密度过小会影响传代细胞的生长，传代细胞的密度应该不低于5×105/ml。之后要做好标记。 继续培养：用酒精棉球擦拭培养瓶，适当旋松瓶盖，放入CO2培养箱中继续培养。传代细胞2-4 h后开始贴附在瓶壁上。

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